Journal of Natural Products Vol. 48, No. 1 , p p . 111-113, Jan-Feb 1985
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FLAVONOIDES DE SALICORNIA EUROPAEA MICHELGESLINet JEAN-FRANCOISVERBIST Universiti de Nantes, Luboratoire de Matiere Mldicale, U .E . R . des Sciences Phamceutiques, I rue Gaston Veii, 44 035 Nantes Cedex. France
champs faibles (de 62,5 a 64,9 ppm) tandis que le signal du C-5” est deplace vers les champs forts (de ~ 7 8 , O a =75,4 ppm). Ces differences sont caracteristiques des effets, sur les carbones (Y et p, de la presence d’un substituant sur I’hydroxyle du carbone (Y (C-6”) (5). Le (malonyl-6” P-D-glucoside)-3 quercetol Ctait accompagne de ses esters mkthylique et ethylique probablement formes lors de son extraction. La derniere substance est un derive du p-Dglucoside-3 quercetol, a caractere cationique (deplacement vers la cathode en electrophorese a p H 2,2). Elle correspond a un ester au niveau de glucose, entre la fonction alcool primaire en 6” et un acide donnant une reaction positive a la ninhydrine. Cependant, les quantites disponibles ne nous ont pas permis d’identifier cette molecule qui est trPs fragile. Les seuls flavonoi‘des mis en evidence anterieurement dans le genre Salirornia etaient deux isoflavones et une flavanone isoles par Arakawa et coll. (6)egalement de S. europaea. C’est donc la premiere fois que des flavonols sont trouves dans les salicornes. PARTIE EXPERIMENTALE
Certaines especes annuelles de salicorne sont parfois utilisees en alimentation. En France, elles sont recoltkes essentiellement dans les marais salants guerandais (Loire-Atlantique). A l’occasion d’une etude chimique et dietktique de ces plantes (I), nous nous sommes interesses aux flavonoi’des de l’une d’entre elles, Salirornia europaea L. (Chenopodiacees). 11s representent 1,2% du poids sec des parties aeriennes de cette espece. Nous avons isole huit flavonols: sept derives du quercetol et un derive de l’isorhamnetol. Quatre d’entre eux sont des produits repandus: le quercetol, le p-D-glucoside-3 quercetol ou isoquercitroside, le rutinoside-3 quercetol ou rutoside et le p-D- glucoside-3 isorhamnitol. Le (malonyl-6” P-D-glucoside)-3 quercetol (1)est ‘le flavonoi’de le plus abondant. Cette substance a deja et6 isolee de quelques plantes (2-4) mais a notre connaissance la position du malonyl en 6” du glucose n’avait pas encore ete precisee. Nous avons pu le situer en comparant les spectres de rmn du ’H et du 13C du P-D-glucoside-3 quercetol avec ceux de son derive malonyle. En rmn du ‘H, les deux doubles dedoubles correspondant aux deux protons en 6” sont deblindis par la proximite du carbonyle de I’acide malonique. En rmn du 13C, le signal du C-6” est diplace vers les
MATERIELVEGETAL.-LeS parties aeriennes de S. europaeu ont et6 rkoltkes dans les rnarais salants de Guerande (Loire-Atlantique, France) en
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juillet 198 1. Un spkirnen est conserve au laboratoire de rnatiere rnedicale de la Faculte de Pharrnacie de Nantes.
EXTRACTION
ET
ISOLEMENT
DES
600 g de poudre lyophilisee ont ete extraits par 1’EtOHa 95% chaud, par percolation. L’extrait ethanolique a tte evapore sous pression reduite a 35”. Le residu obtenu a et6 repris par l’eau bouillante et la solution aqueuse irnrnediaternent filtrk. Apres refroidissernent, elle a ete epuisee successivernent par l’ether de pktrole, I’Et,O, I’EtOAc et le n-BuOH. Les flavono’ides ont ere isoles a partir des fractions EtOAc et n-BuOH a I’aide de plusieurs systernes de chromatographie sur colonne: 1, colonne pressurisee de silice greffk C18 15-25 Krn, solvants: melanges MeOH-H,O (10:90 a 35:75) en gradients discontinus; 2, colonne ouvert de cellulose rnicrocristalline Avicel MERCK, solvants: H 2 0 ou HOAc a 2 ou 4% dans I’eau; 3, colonne ptessurisee de d i c e Lichroprep DIOL 2540 prn MERCK, solvants CHC1,-MeOH (90: 10 a 70:30) en gradients discontinus. Nous avons obtenu: 56 rng de quercetol, 280 mg de P-D-glucoside-3 quercetol, 20 mg de rutoside, 25 rng de P-D-glucoside-3 isorharnnetol, 420 rng de (rnalonyl-6”-P-D-glucoside)-3 quercitol (1) accornpagne de ses esters rnethylique et ethylique (36 et 66 rng), et 50 rng de I’ester d’isoquercitrosidenon identifie. La purete de ces substances aete verifiee a I’aide de seize systernes de ccrn (silice, d i c e greffk C18, cellulose, polyamide). FLAVONOIDES.-~
IDENTIFICATION.-LeS Spectres Ont et6 enregistres avec les instruments suivants: spectrophotornetre uv Beckrnan BD-G, spectrographe de masse en dborption de champ Varian MAT 3 11 A, spectrographe de rrnn du ‘H et du I3C Brucker W M 250. Tous les flavonoi’des ont ete analysks par spectrometrie uv (7) et par I’etude ccrn et spectrometrique uv de leurs hydrolysats acide (8), enzyrnatique (P-glucosidase) (9) et alcalin. Quercetol, P-D-glucoside-3-quercetol, et rutoside onr ete chromatographies en couche mince par rapport a des t h o i n s . Rutoside et ester non identifie d’isoquercitrosideont et6 analyses par rmn du ‘H (250 MHz, DMSO-&, TMS). P-D-glucoside-3quercetol, (rnalonyl-6”P-glucoside)-3-quercttol (l),et ses esters methylique et ethylique ont et6 spectrographies par srn (dc) et rrnn du ’H (250 MHz, CD,OD, TMS) et du I3C (apt, 62,9 MHz, CD,OD, TMS) ( 1 0 , l l ) . Nous prkcisons simplernent I’identification de 1. (Malonyl-6”P-D-glucosiL)-3 quercktol (1).Hydrolyse acide: quercetol+glucose. Hydrolyse par la P-glucosidase: negatif. Hydrolyse alcaline: P-D-glucoside-3 quercCtol+acide rnalonique, uv: spectres avec les divers reactifs (7) sernblables a ceux du P-D-glucoside-3 quercetol. Elec-
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trophorese p H 6,6: dtplacernent vers I’anode. srn (dc) rn/z (5%): 55 1 (100) ( M H f ) , 507 (26) (MH+COJ, 465 (12) (MH+- CO-CH,-COO-). Rrnn du ’H (250 MHz, CD,OD, TMS), 6 ppm: 7,63 ( l H , d,]=2,1 Hz, H-2’), 7,57 ( l H , dd,]=8,4 Hz,]’=2,1 Hz, H-6‘), 6,85 ( l H , d,J=8,4 Hz, H-5’), 6 , 3 9 ( 1 H , d , J = 2 , 0 H z , H-8), 6 , 2 1 ( 1 H , d , J = 2 , 0 H ~ , H - 6 ) ,5 , 0 7 ( 1 H , d , J = 7 , 3 H z , H l”), 4,85 (H,O), 4,26 ( l H , dd, /=11,5 Hz, ]’=1 Hz, H-b”b), 4,12 ( l H , dd,]=11,5 Hz, ]’=4,5 Hz, H-b”a), 3 , 5 0 a 3 , 2 3 ( = 1 0 H , rn, H2”, H-3”, H-4”, H-5“, +CH, acide rnalonique+’H residuels de CD30D). Rmn du I3C (apt, 62,9 MHz, CD30D, TMS), 6 ppm: 179,3 (C-4), 170,2 (C carboxylique de I’acide rnalonique), 168,4 (C ester carboxylique de I’acide rnalonique), 165,9 (C-7), 162,9 (C-5), 159,5 (C-2 ou C-9), 158,4 (C-2 ou C-9), 149,7 (C-4‘), 145,7 (C-3’), 135,5 (C-3). 123,3 (C-6’), 123,0(C-l’), 117,5 (C-5’0uC-2’), 115,8(C-5‘ ou C-2’), 105,6 (C-lo), 104,7 (C-l”), 9 9 , 9 (C6), 94,8 (C-8), 77,8 (C-3”), 75,5 (C-2” ou C-5”). ?5,4 (C-2”0~C-5”),71,0(C-4”), 64,9(C-6“), 50 a 48 (CD,OD+C methylenique de l’acide rnalonique). REMERCIEMENTS Nous rernercions M.M. Godeau pour I’identification de Salicornia europaeu, Mme M. BrumBousquet pour le ternoin d’isorquercitroside, MM. J.C. Prome et J. Roussel de Centre de Recherche de Biochirnie et GenCtique Cellulaire du CNRS de Toulouse pour la rhlisation des spectres de masse (dc), Mrne F. Mabon et MM. N . Naulet et M. Berry du laboratoire de Chirnie Organique Physique de la Faculte des Sciences de Nantes pour I’enregistrement des spectres de rrnn du ‘H et du I3C et leur contribution a leur interpretation. BIBLIOGRAPHIE 1.
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